行业资讯丨TrypLE和Trypsin的对比以及TrypLE的检测

TrypLE和Trypsin的对比以及TrypLE的检测

胰酶消化的细节，你知道多少？

细胞学实验中我们除了遇到污染的难题之外，消化的问题，也不容小觑。消化不好，就会导致细胞状态变差，甚至死亡。尤其是在某些需要无血清培养的贴壁细胞中，可以尝试用 TrypLE消化细胞，因为TrypLE不需要胰酶抑制剂终止消化，直接用PBS稀释终止消化就可以了。这样避免了与血清的直接接触，血清中的复杂成分也不会干扰细胞潜在的生理功能，改变细胞分裂的正常状态，对于一些敏感细胞来说，这个改变是致命的。

有科学家称，在培养某种上皮细胞时，一开始用trypsin消化血清终止之后，细胞还是正常生长的，但是发现细胞消化重悬之后细胞贴壁，但是不变形，总是以为消化时间过长导致的；后来降低了消化时间，情况未改观，并且一次比一次明显；到最后，细胞附着在培养瓶底部、球形、一直不变形；而变了形的细胞，状态和之前的完全不一样，好像变成了另外一种细胞，最后很快就死亡了。后来更换使用了TrypLE，情况发生好转，因为不需要用血清终止消化，只需要用PBS终止消化就可以了，细胞生长状态明显变好。

让我们看一下TrypLE和Trypsin具体各有什么优缺点吧。

Trypsin的缺点：

细胞损伤大－－Trypsin抑制剂需要将酶快速灭活，这会导致细胞损失或死亡。

需冷冻保存－－Trypsin必须保存在－20 ℃，在经过多次反复冻融或在4 ℃长期保存后，稳定性丧失。

批间差异大－－Trypsin为动物源性，批次之间差异性大。

TrypLE的优势

细胞损伤小－－TrypLE为非动物源性的消化酶，更纯，对细胞损伤更小，提高种板效率。因为TrypLE作用细胞温和，不需要 Trypsin酶抑制剂。

稳定性很高－－TrypLE可以稳定的保存于室温，节省了冷冻空间，同时提供即时可用的便利。

应用范围广－－TrypLE是在有血清或无血清环境中培养的多种不同细胞系的理想选择，可以直接替代您现有步骤中所用的0.25% trypsin EDTA试剂。

TrypLE的超高稳定性

TrypLE表现的动力学及剪切特异性与 Trypsin 非常近似，而其稳定性却比前者有明显提高。工作储存温度可以为室温保存6个月或37℃一周后酶活性仍不丢失。TrypLE试剂的纯度比Trypsin高，室温稳定性比较高。

所以，TrypLE就相当于某些无血清生长的贴壁细胞的救星啦！

TrypLE检测

在单抗药物、疫苗类药物以及细胞治疗药物等生产中， TrypLE已经广泛的被使用来对贴壁细胞进行消化。生物制品生产相关法规中明确了细胞培养时添加物（如TrypLE、核酸酶、BSA等）检测的必要性，故TrypLE的残留量检测也愈发引起重视。

3868la银河总站生物自主研发的重组胰蛋白酶类似物定量检测试剂盒可以有效，快速，便捷地检测各种样品中TrypLE的残留量。