抗体药 Protein A 的残留质控，通用性很重要

       天然的蛋白A（Staphylococcal Protein A，SPA）是分离自金黄色葡萄球菌细胞壁的一种蛋白质。其含有E、D、A、B、C共5个同源性较高的抗体IgG结合结构域，以及1个胞膜结合结构域。

       蛋白A与抗体IgG的Fc段特异性结合，与抗体IgG的Fab段有较弱结合。利用蛋白A与抗体Fc段的高亲和力，将蛋白A通过共价偶联结合于纯化介质之上，制备的蛋白A亲和层析填料广泛地应用于抗体类产品的生产纯化过程中。

上图引用自文献 Amritkar V , Adat S , Tejwani V ,et al.Engineering Staphylococcal Protein A for high-throughput affinity purification of monoclonal antibodies[J].Biotechnology Advances: An International Review Journal, 2020(44-):44.

检测必要性  NECESSITY OF DETECTION

       蛋白A作为抗体类药物生产时多用到的纯化柱填料，其不可避免会有蛋白A配基脱落，导致抗体药物中蛋白A的残留。这些微量残留对抗体药物的安全性（引起机体副反应）和有效性（影响药效和药代动力学）具有潜在的隐患，使其成为工艺相关杂质。

相关法规  REGULATIONS

01 2020版《中国药典》

       第三部《人用重组单克隆抗体制品总论》3.2.4 工艺相关杂质章节中提出“采用适宜的方法对供试品宿主蛋白质、宿主细胞和载体DNA、蛋白A及其他工艺相关杂质进行检测。供试品测定结果应在规定的范围内。”

02 2020版《中国药典》

       第三部《尼妥珠单抗注射液》3.1.3.3 蛋白质A残留量中提出“用酶联免疫吸附法（通则3429）测定，蛋白质A残留量应不高于蛋白质总量的0.001%”。

03 美国 FDA

       美国FDA提出在定量检测蛋白A时，应尽可能使用高度灵敏的分析方法，并且结果应低于该方法可检测水平。

04 美国USP130

       USP130《PROTEIN A QUALITY ATTRIBUTES》表示，“在纯化人用抗体时应清除滤出的蛋白A，并相应验证生产工艺。基于酶联免疫吸附试验(ELISA)的残留检测通常用于工艺开发和验证，以确保在蛋白A亲和层析后的工艺步骤中有效去除残留蛋白A”。

3868la银河总站 Protein A ELISA KIT

       3868la银河总站生物自主研发生产的蛋白A（Protein A）残留检测试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法，可定量检测各种生物制品中蛋白A的残留量。具有通用性高、操作简便等优势，并经过了全面的性能验证。该试剂盒遵循ISO13485质量管理体系进行研发生产。

产品优势 | PRODECT ADVANTAGE

通用性高：可以检测国外主流的4种标准品，以及国内多种天然、重组、耐碱型蛋白A标准品（MabSelect SuRe（Cytiva） 、MabSelect PrismA（Cytiva）、TOYOPEARL AF-rProtein A(HC)-650F（Tosoh） 、Eshmuno A（Merck） ）

操作简便：37℃静置反应，无需振荡。步骤简便，实验操作时间短

性能优异：检测限低至5.12pg/mL，准确度高，重复性好

性能指标 | PERFORMANCE INDEX

验证数据 | VALIDATION DATA

标准曲线是经4-PL拟合得到，P0111A-96检测范围在5.12-500pg/mL，R2可达到0.99。

试剂盒通用性：

3868la银河总站生物蛋白A（Protein A）残留检测试剂盒（P0111A-96）可检测的蛋白A类型有MabSelect SuRe（Cytiva）、MabSelect PrismA（Cytiva）、Eshmuno A（Merck）、TOYOPEARL AF-rProtein A（HC）-650F（Tosoh）、重组耐碱蛋白A（杭州纽龙）、重组金黄色葡萄球菌蛋白A（杭州纽龙）、rProtein A（楚天微球）等。

试剂盒准确度：

经验证，3868la银河总站生物蛋白A（Protein A）残留检测试剂盒（P0111A-96）检测高、中、低浓度质控品，测量偏差绝对值均≤15%

样品加标回收率检测：